基金项目: 国家自然科学基金(编号:30971226);; 安徽省自然科学基金(编号:090413116)
作者:施锐;汪渊;
关键词:全反式维甲酸;;胃癌;;凋亡;;caveolin-1;;Bcl-2
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2012.11.024
〔摘 要〕 目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对人胃腺癌SGC7901细胞的增殖、凋亡和迁移影响及其可能机制,同时分析ATRA对胞膜蛋白caveolin-1表达和定位的影响。方法 MTT法检测ATRA在不同浓度(5、10、25、50、100μmol/L)和不同时间(24、48、72 h)对人胃腺癌SGC7901细胞增殖的影响;Ho-chest33258染色实验观察ATRA对人胃腺癌SGC7901细胞凋亡的影响;细胞划痕实验观察AT-RA对人胃腺癌SGC7901细胞迁移的影响;Westernblot分析ATRA对人胃腺癌SGC7901细胞凋亡相关蛋白、ERK磷酸化水平和caveolin-1表达的影响;免疫荧光法检测caveolin-1在人胃腺癌SGC7901细胞中的表达和定位。结果 MTT实验显示ATRA可明显抑制人胃腺癌SGC7901细胞增殖。Hochest33258染色实验显示ATRA促进人胃腺癌SGC7901细胞凋亡。细胞划痕实验示ATRA可明显抑制人胃腺癌SGC7901细胞迁移。Western blot实验表明:①ATRA降低人胃腺癌SGC7901细胞的凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,而对凋亡促进蛋白Bax和酶原活性的caspase-3无明显影响;②ATRA抑制人胃腺癌SGC7901细胞的ERK磷酸化水平:从45 min开始下降,到2 h达到最大抑制,随后抑制作用逐渐减弱;③ATRA处理人胃腺癌SGC7901细胞后caveo-lin-1表达没有影响,但胞浆内caveolin-1含量明显降低,胞膜上caveolin-1表达明显增加。免疫荧光实验发现ATRA促进人胃腺癌SGC7901细胞的caveo-lin-1在细胞膜上定位。结论 ATRA可明显抑制人胃腺癌SGC7901细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞迁移,降低ERK的磷酸化水平,增加caveolin-1在细胞膜上定位。