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一种靶向HER2嵌合抗原受体CAR THP-1细胞系的构建

安徽医科大学学报 2023 03 v.58 352-357     字体:

基金项目: 国家自然科学基金(编号:31900616);;安徽省教育厅科学研究项目(编号:YJS20210292)

作者:陈义昭;刘丽华;朱向玲;王卉卉;吴旭铭;檀学文;方亦龙;蒋海峰;许振;魏伟;涂佳杰;

关键词:嵌合抗原受体巨噬细胞;;肿瘤细胞;;吞噬;;慢病毒

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.03.002

〔摘 要〕 目的获得稳定转染靶向人类表皮生长因子2(HER2)的嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M)。方法构建靶向HER2的CAR慢病毒载体并感染人单核细胞白血病细胞系(THP-1)。通过分选流式细胞仪分选出含有绿色荧光标记的CAR THP-1细胞并在体外继续培养。将此靶向HER2的CAR THP-1细胞与HER2表达阴性(-)及阳性(+)的子宫内膜癌细胞系Ishikawa分别共培养,通过成像流式细胞仪检测其对HER2表达阳性肿瘤细胞的靶向吞噬,通过流式细胞仪检测其对HER2表达阳性肿瘤细胞的靶向吞噬比例。结果CAR慢病毒感染THP-1细胞效率较低;与癌细胞共培养后,流式细胞术及成像流式细胞术结果显示,CAR THP-1组与空载体组相比,CAR THP-1细胞对HER2阳性的Ishikawa细胞吞噬能力增强(P<0.01)。结论通过构建CAR慢病毒载体并转染THP-1细胞,成功建立了靶向HER2的CAR THP-1细胞系,且其能通过特异性靶向吞噬HER2阳性Ishikawa细胞。