安徽医科大学学报
2002 01 18-21
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基金项目: 安徽医科大学自然科学基金 (编号 :5 2 2 0 95、990 7、990 4);; 安徽省自然科学基金 (编号 :990 44312 );; 安徽省教育厅自然科学基金 (编号 :JL97 0 77)
作者：刘晓颖,汪惠园,鲁云霞,周青,桂淑玉,夏瑞祥,袁凌云,汪渊
关键词：基因,p16;;甲基化
DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2002.01.007
〔摘 要〕 目的 建立 p16基因中CpG岛的甲基化分析方法 ,即甲基化特异的PCR(methylation specificpolymerasechainreaction ,MSP)方法及其初步应用。方法 用亚硫酸氢钠修饰变性后的被测DNA ,随之进行甲基化、非甲基化特异的PCR扩增。应用MSP法分析白血病患者的白细胞 p16基因5′CpG岛的甲基化变异情况。结果 用加热法变性DNA ,亚硫酸氢盐修饰DNA ,WizardDNA纯化树脂除盐、纯化修饰后的DNA都获得了成功 ,并建立了MSP分析p16基因甲基化的方法。白血病患者的白细胞 p16基因的 5′CpG岛有一定比例的甲基化变异。结论 MSP是一种较为简便、敏感且具有高度特异性的检测任何基因的CpG区域甲基化位点的分析方法