基金项目: 国家自然科学基金重大研究计划培育项目(编号:91842101)
作者:杨凤娇;黄紫薇;赵殿元;徐龙;唐丽;
关键词:Tnfrsf11a~(Cre);;Rosa26~(yfp);;组织巨噬细胞;;脑小胶质细胞;;Cre重组酶;;报告基因小鼠;;流式细胞术
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.09.001
〔摘 要〕 目的 构建Tnfrsf11a~(Cre)Rosa26~(yfp)报告基因小鼠,检测Tnfrsf11a~(Cre)介导黄色荧光素蛋白YFP标记组织巨噬细胞的效率。方法 将Tnfrsf11a~(Cre)小鼠与Rosa26~(yfp)小鼠交配,通过PCR筛选出Tnfrsf11a~(Cre)Rosa26~(yfp)报告基因小鼠。分离成年Tnfrsf11a~(Cre)Rosa26~(yfp)小鼠脑小胶质细胞、肝脏巨噬细胞、肾脏巨噬细胞、肺泡巨噬细胞、脾脏巨噬细胞,标记流式抗体,通过流式细胞术分析Tnfrsf11a~(Cre)介导荧光素蛋白YFP标记组织巨噬细胞的效率。结果 Tnfrsf11a~(Cre)介导黄色荧光素蛋白YFP对脑小胶质细胞具有约91.27%的标记效率,但对肝脏、脾脏、肺泡巨噬细胞细胞的标记效率分别只有约63.60%、69.66%、32.76%。结论 Tnfrsf11a~(Cre)可以介导YFP对脑小胶质细胞进行示踪。同时,Tnfrsf11a~(Cre)可用做脑小胶质细胞基因条件性敲除的工具鼠。