基金项目: 河北省高等学校自然科学研究青年基金项目(编号:QN2020107);;河北省医学科学研究课题计划项目(编号:20200378、20200352)
作者:纪海茹;孔令伟;曹胜;吕家兴;李佳欣;刘春雨;金宇;
关键词:骨肉瘤;;组织蛋白酶S;;siRNA;;增殖;;Wnt/β-catenin
DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.09.022
〔摘 要〕 目的 探讨组织蛋白酶S(Cat S)对人骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在调控机制。方法 以正常成骨细胞(hFOB)和人骨肉瘤细胞(SAOS2和MG63)作为研究对象,将Cat S小干扰RNA(si-Cat S)和阴性对照序列(si-NC)转染至SAOS2和MG63细胞中以改变Cat S在人骨肉瘤细胞中的表达。将实验细胞分为4组:hFOB组(hFOB细胞)、Control组(未转染的SAOS2或MG63细胞)、si-NC组(转染了si-NC的SAOS2或MG63细胞)和si-Cat S组(转染了si-Cat S的SAOS2或MG63细胞)。RT-PCR和Western blot法检测Cat S在SAOS2和MG63细胞中的表达;CCK-8和克隆形成实验检测敲低Cat S对SAOS2和MG63细胞增殖活性的影响;划痕和Transwell实验分别检测敲低Cat S对SAOS2和MG63细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot实验检测敲低SAOS2对SAOS2细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax和Caspase-3)和Wnt/β-catenin通路相关蛋白(LRP5、β-catenin、C-myc和Cyclin D1)的影响。结果 与hFOB组比较,Cat S在SAOS2组和MG63组中的表达上调(P