〔摘　要〕 应用生物信息学方法对人胃内因子进行理化性质分析，并对该蛋白进行真核表达与纯化 。方法 利用蛋白质在线分析软件预测胃内因子理化性质并分析其亲水性和疏水性；利用在线工具预测分析人胃内因子信号肽及其亚细胞定位。构建真核表达重组质粒 pcDNA3. 1( + ) ⁃human GIF⁃His tag, 在 HEK293F 细胞表达后经镍柱纯化获得胃内因子；采用 SDS⁃PAGE、Western blot 与间接 ELISA 分别验证纯化的胃内因子纯度及活性 。结果 胃内因子含有 417 个氨基酸，是亲水性酸性稳定蛋白，属于分泌蛋白且具有 Sec 原始信号肽；成功构建 pcDNA3. 1( + ) ⁃human GIF⁃His tag 重组质粒，并在 HEK293F 细胞表达系统中获得可溶性表达 。结论 成功制得真核来源的人胃内因子，生物信息学结果显示该蛋白为亲水酸性稳定分泌蛋白，为后续使用该蛋白作为免疫原及蛋白校准品以构建胃内因子免疫检测方法奠定了基础。