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不同剂量X射线联合异体淋巴细胞输注对建立再生障碍性贫血小鼠模型的影响

安徽医科大学学报 2025, 08, v.60 1387-1393     字体:

基金项目: 国家自然科学基金面上项目(编号:82370225);安徽省转化医学研究院科研基金项目(编号:2023zhyx-B08)~~

作者:周晓晓;徐彩仙;汪桂琴;洪强;陶千山;李丛;王会平;翟志敏;

关键词:再生障碍性贫血;异体淋巴细胞;X 射线;外周血;生存率;骨髓;免疫

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2025.08.004

〔摘 要〕 探讨不同剂量 X 射线联合异体淋巴细胞输注对建立再生障碍性贫血小鼠模型的影响 。方法 取 BALB/c 小鼠40 只,随机分为对照组(n = 12) 、3 Gy 组(n = 9) 、4 Gy 组(n = 9) 、5 Gy 组(n = 10) 。3 Gy、4 Gy、5 Gy 组指经过相应剂量的 X 射 线辐照并在辐照后 4 h 内尾静脉输注 0. 2 mL DBA/2 小鼠胸腺、脾脏细胞混合悬液,浓度为 1 × 107 个/mL。对照组不经过 X射线辐照,并输注等体积生理盐水 。BALB/c 小鼠经眼眶静脉丛采血,用小鼠血常规分析仪检测外周血红细胞( RBC) 、白细胞(WBC) 、血小板(PLT) 。每日观察小鼠一般情况,统计各组生存率 。实验终点,取小鼠胫骨做苏木精 -伊红染色( HE) , 同时取股骨做骨髓涂片进行形态学检测;流式细胞术检测 5 Gy 组 T 细胞亚群,酶联免疫吸附测定(ELISA) 检测细胞因子 。结果3 Gy 组,全血细胞减少,但血小板恢复较快,造模第 17 天恢复正常水平 。观察期内小鼠无死亡 。实验终点,骨髓形态学表明骨髓增生活跃,粒细胞系、红细胞系比值正常,各阶段细胞形态未见明显异常 。HE 结果表明对照组骨髓组织致密,组织中充满血细胞 。4 Gy 组,全血细胞减少且一直维持到观察终点 。观察期内生存率为 90% 。实验终点,骨髓形态学表明骨髓增生降低 。HE 结果表明骨髓组织较少脂肪浸润 。5 Gy 组,全血细胞减少,但红细胞在 24 d 恢复正常水平 。观察期内生存率为50% 。实验终点,骨髓形态学表明骨髓小粒空虚,造血细胞减少,多呈非造血细胞 。HE 结果表明 5 Gy 组骨髓组织严重脂肪浸润,几乎无幼稚细胞和造血前体细胞 。流式检测结果显示 CD4 + T(% )细胞比例降低、CD8 + T(% )细胞比例增加 。ELISA 结果显示负造血调控因子干扰素⁃γ(IFN⁃γ) 、肿瘤坏死因子⁃α (TNF⁃α ) 的分泌升高 。结论 不同剂量的射线联合异体淋巴细胞输注均可导致小鼠外周血 RBC、WBC、PLT 降低 。结合骨髓形态学、骨髓 HE 染色和免疫学相关指标,5 Gy X 射线联合 2 × 10²个异体淋巴细胞输注可用于建立再生障碍性贫血小鼠模型。