基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:81903553); 山东省自然科学基金项目(编号:ZR2017QH006); 山东省医药卫生科技项目(编号:202413020723);
作者:于凌波;张亚东;许瑞;孙钰钰;王慧云;杨金津;崔亚男
关键词:超滤;葡聚糖凝胶;分离纯化;转铁蛋白;药物递送系统;配体密度;
DOI:专辑:工程科技Ⅰ辑;医药卫生科技
〔摘 要〕 目的 以纯化效率和胶束纯度为指标,比较超滤法与葡聚糖凝胶法纯化转铁蛋白/聚己内酯(Tfn/PCL)胶束的效果。方法 通过薄膜分散法制备载有香豆素-6(C6)的聚己内酯(PCL)胶束,然后通过成酰胺反应将转铁蛋白(Tfn)修饰到胶束表面。共制备了两种Tfn密度的胶束:Tfn/PCL高和Tfn/PCL低;并对胶束进行了初步制剂学表征。通过超滤法和葡聚糖凝胶法对两种胶束进行了分离纯化,并对纯化效率进行了分析比较,计算纯化后胶束表面Tfn的修饰密度。结果 制备的PCL胶束平均粒径为73nm,载药量为0.046%。经Tfn修饰后,Tfn/PCL高和Tfn/PCL低平均粒径分别在134 nm和158nm,大小均匀。纯化结果表明,在超滤法中,对于Tfn/PCL高和Tfn/PCL低,分别滤过2次和1次后,Tfn与C6浓度比值分别稳定在23.6和3.4;在葡聚糖凝胶法中,对于Tfn/PCL高,滤过2次后Tfn与C6浓度比值稳定在23.7;而对于Tfn/PCL低组,4次滤液中的Tfn/C6的比值变化呈上升趋势,滤过第4次的Tfn/C6比值较滤过第1次的Tfn/C6比值增大,存在显著性差异(P=0.0424)。通过计算Tfn/PCL高和Tfn/PCL低表面Tfn修饰密度,得出超滤法修饰密度分别为94.9%和13.8%,葡聚糖凝胶法修饰密度分别为95.6%和14.4%,且在Tfn/PCL低组两种方法差异具有统计学(P=0.0002)。结论 超滤法和葡聚糖凝胶法的纯化效率相近,但葡聚糖凝胶法纯化后获得的Tfn/PCL胶束更纯,表面Tfn修饰密度更大,这一差异在Tfn/PCL低胶束纯化中表现尤为明显。