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敲低TMEM16B减轻大鼠脑缺血再灌注损伤后脑水肿并保护血脑屏障

安徽医科大学学报     字体:

基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:82160235);

作者:张婧彬;刘倩;潘紫燕;姚天锡;殷姜文

关键词:跨膜蛋白16B;脑缺血再灌注损伤;大脑中动脉栓塞模型;脑水肿;血脑屏障;神经保护;

DOI:专辑:医药卫生科技

〔摘 要〕 目的 探究跨膜蛋白16B(TMEM16B)在大鼠脑缺血再灌注损伤后对脑水肿和血脑屏障的作用。方法 使用腺相关病毒上调或下调TMEM16B的表达,制备大鼠的大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,随机分为Sham组、MCAO组、空载组、过表达组、敲低组。造模后第1天通过mNSS评分综合评估大鼠运动感觉情况,造模后第3天通过粘连胶实验、圆筒实验评估大鼠感觉运动功能;通过电镜观察缺血侧脑组织的超微结构;通过脑组织干湿重比反映各组脑含水量;通过免疫荧光和Westernblot检测TMEM16B与水通道蛋白4(AQP4)、紧密连接蛋白5(Claudin5)和闭锁连接蛋白-1(ZO-1)的表达水平。结果 与空载组比较,过表达组的大鼠感觉运动功能减弱;线粒体肿胀,嵴消失,紧密连接消失;脑含水量增多;TMEM16B和AQP4表达量增多,Claudin5和ZO-1表达量降低。而敲低组的大鼠与空载组比较在运动功能方面有所恢复;线粒体嵴明显,基底膜部分模糊;脑含水量降低;TMEM16B和AQP4表达量减少,Claudin5和ZO-1表达量增多。结论TMEM16B增多会加重脑缺血再灌注损伤后大鼠的脑水肿并加重血脑屏障损伤,而减少TMEM16B表达则会减轻脑水肿并保护血脑屏障。