基金项目: 安徽省自然科学基金项目(编号:1908085MH284);
作者:李式浩;赵兵;杨铁牛;杨金亮;张永亮;李仲森;李顺利;陈宁;王建标;李佳;马庆防
关键词:胶质母细胞瘤;PI3K/AKT/mTOR信号通路;FAH;肿瘤微环境;预后;肿瘤进展;
DOI:专辑:医药卫生科技
〔摘 要〕 目的 探讨延胡索酰乙酰乙酸水解酶(FAH)在胶质母细胞瘤(GBM)进展中的作用及其潜在分子机制。方法 对癌症基因组图谱(TCGA)-GBM、GSE4290和GSE116520数据集进行差异表达分析。应用加权基因共表达网络分析 (WGCNA) 识别关键模块,并采用 Cox 回归和风险模型筛选预后基因。利用单细胞RNA测序集对预后基因进行免疫浸润分析。TCGA和人类蛋白质图谱(HPA)数据库中分析FAH在GBM中的临床表达特征。体内外实验验证FAH的功能作用,并进行通路分析以探究潜在机制。结果 在3个GBM数据集中共鉴定出152个交集基因(P<0.05)。WGCNA显示,绿松石色模块与肿瘤纯度、基质评分、免疫评分和ESTIMATE评分关联最为密切(P<0.001)。与正常组织相比,3个预后基因(CTSD、FAH、THBD)在GBM中均表达上调,且与免疫浸润相关(P<0.05)。与正常组织相比,GBM组织中FAH的mRNA和蛋白表达升高,并且FAH与年龄分层和TP53突变显著相关(P<0.05)。CCK-8实验实验结果显示,与shNC组相比,shFAH组GBM细胞的增殖活性降低(P<0.001)。Transwell迁移和侵袭实验结果显示,与shNC组相比,shFAH组细胞的迁移和侵袭数量下降(P<0.05)。Western blot检测结果显示,与shNC组相比,shFAH组中PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达水平减少(P<0.05)。体内皮下成瘤实验进一步证实,与shNC组相比,shFAH组小鼠肿瘤体积和重量均降低(P<0.001)。结论 FAH通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进GBM进展,可作为GBM的潜在治疗靶点。