基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:82060518、U1503125);
作者:张雪晨;董杨柳;赵博;夏宗一;董昭成;者湘漪;潘贞贞;潘泽民
关键词:CDH18;宫颈癌;Wnt/β-catenin信号通路;XAV939;细胞增殖;细胞迁移;
DOI:专辑:医药卫生科技
〔摘 要〕 目的 揭示在宫颈癌细胞中过表达和敲低钙黏蛋白18(CDH18)基因后通过Wnt/β-catenin信号通路对宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法 生物信息学STRING数据库(http://cn.string-db.org)对与CDH18蛋白有相互作用的分子进行全面分析;利用生物信息学AutoDock软件(http://autodock.scripps.edu)完成XAV939和β-连环蛋白(β-catenin)的分子对接;通过激光共聚焦荧光显微镜检测CDH18基因影响β-catenin在细胞质和细胞核的分布;采用EdU实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测过表达、敲低CDH18基因和Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV939处理对细胞增殖和迁移能力的影响;采用Westernblot检测过表达和敲低CDH18基因和XAV939处理对Wnt/β-catenin信号通路相关分子β-catenin、T细胞因子/淋巴样增强因子4(TCF4)和细胞髓细胞瘤病癌基因(c-Myc)表达水平的影响。结果 SiHa和HeLa细胞过表达CDH18基因后Wnt/β-catenin信号通路分子β-catenin、TCF4和c-Myc的蛋白表达水平增加,GSK-3β的蛋白表达水平减少,细胞增殖和迁移能力提升,差异具有统计学意义(P<0.05)。相反,敲低CDH18基因后Wnt/β-catenin信号通路分子β-catenin、TCF4和c-Myc的蛋白表达水平减少,GSK-3β的蛋白表达水平增加,细胞增殖和迁移能力减弱,差异具有统计学意义(P<0.05)。在SiHa和HeLa细胞中加入XAV939后,Wnt/β-catenin信号通路分子β-catenin、TCF4和c-Myc的蛋白表达水平减少,GSK-3β的蛋白表达水平增加,细胞增殖和迁移能力减弱,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 CDH18通过Wnt/β-catenin信号通路促进宫颈癌细胞增殖和迁移能力。