〔摘　要〕 目的 制备运载双层抗原的CS-PLGA微球制剂，并对其进行相关表征鉴定。方法 通过复乳法结合溶剂挥发法制备得到多孔微球后，在4℃水浴条件下装载抗原，利用抗原浓度梯度介导的物理扩散促进抗原进入微球内部，并通过静电作用结合在微球外表面，形成内外双层抗原运载。根据聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)材料玻璃转化温度这一特性，促进多孔微球表面孔道在48℃条件下发生愈合，使其形成闭合的微球制剂，再将得到的微球制剂与壳聚糖溶液混悬镀层，进行阳离子修饰，逆转微球表面负性电位。通过扫描电子显微镜、动态光散射粒度仪等检测微球形态、粒径分布和电位变化，采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定抗原是否装载至微球制剂中，采用荧光标记的BSA和荧光标记的PLGA材料进行激光共聚焦显微镜观察抗原装载后的分布情况，通过BCA法检测微球制剂的包封率和载药率。结果 扫描电镜和光学显微镜结果显示多孔微球成孔良好，粒径大小为(73.94±0.81)nm,多分散性指数为0.038±0.004。Zeta电位由负转正说明壳聚糖已被成功镀层至微球表面。经过SDS-PAGE、激光共聚焦显微镜等证实BSA已被成功运载。经micro BCA试剂盒检测后多孔微球包封率为(3.01±0.04)%,载药率为(1.50±0.02)%。结论 成功制备得到运载双层抗原的CS-PLGA制剂，为后续缓控释制剂研究提供新思路。