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基于Cre/Loxp系统的Csf1r-Cre~(ERT2)R26R~(EYFP)报告基因小鼠的构建及效率检测

安徽医科大学学报 2024 07 v.59 1175-1180     字体:

基金项目: 安徽省教育厅高校科学研究项目(编号:2022AH020052)

作者:朱向玲;吴旭铭;王卉卉;周园园;王安琪;张慧茹;刘崇;涂佳杰;

关键词:Csf1r-Cre~(ERT2);;R26R~(EYFP);;Cre/LoxP系统;;CD45;;流式细胞术

DOI:10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2024.07.010

〔摘 要〕 目的 构建报告基因小鼠,评价Csf1r-Cre~(ERT2)介导增强黄色荧光素蛋白EYFP标记组织CD45~+细胞CSF1R的效率。方法 Csf1r-Cre~(ERT2)小鼠与R26R~(EYFP)小鼠繁育,他莫昔芬诱导、PCR筛选Csf1r-Cre~(ERT2) R26R~(EYFP)小鼠,流式细胞术和Western blot分析EYFP对不同组织以及不同组织CD45~+细胞中CSF1R的标记效率。结果 获得Csf1r-Cre~(ERT2) R26R~(EYFP)报告基因小鼠。此外,Csf1r-Cre~(ERT2)小鼠介导EYFP可有效标记小鼠组织CSF1R以及不同部位中CD45~+细胞。与R26R~(EYFP)组比较,Csf1r-Cre~(ERT2)小鼠介导EYFP标记效率最高的是脑组织(P<0.001),最低的是胸腺组织(P<0.05),脾脏组织则差异无统计学意义。结论 成年Csf1r-Cre~(ERT2)小鼠与R26R~(EYFP)小鼠是获得Csf1r-Cre~(ERT2) R26R~(EYFP)诱导型条件性荧光小鼠的有效途径。Csf1r-Cre~(ERT2)介导EYFP可对小鼠不同部位CSF1R以及CD45~+细胞中CSF1R进行有效示踪。