基金项目: 国家自然科学基金项目(编号:82260402); 贵州省科技计划项目(编号:黔科合基础-ZK[2022]一般341、黔科合中引地[2025]024、黔科合平台人才-ZDSYS[2023]004); 国家科技部及教育部“111计划”项目(编号:D20009);
作者:罗婷婷;孙建超;杨廷秀;许晓丽;崔古贞;罗庆;卓书伟;刘琦;陈峥宏
关键词:幽门螺杆菌;念珠菌;ureA基因;免疫磁珠分离法;扫描电子显微镜;尿素酶;
DOI:专辑:医药卫生科技
〔摘 要〕 目的 探究幽门螺杆菌(H. pylori)特异性基因聚合酶链式反应(PCR)阳性的临床分离的胃念珠菌、阴道念珠菌和大便念珠菌释放H. pylori的能力。方法 复苏实验室从临床分离的4株H. pylori特异性16S rDNA和ureA基因PCR阳性的念珠菌菌株及白念珠菌标准菌株ATCC10231(Ca10231),通过PCR确认5株念珠菌菌株H. pylori ureA基因阳性情况。将上述念珠菌与H. pylori菌株接种于尿素培养基,于37 ℃恒温培养箱进行培养,逐日观察培养基的颜色变化,若培养基颜色由黄色变为红色,则具有尿素酶活性。使用包被H. pylori抗体的磁珠与上述5株念珠菌菌株及H. pylori菌株分别进行共同孵育,通过生物扫描电子显微镜(SEM)观察磁珠表面H. pylori的吸附情况,采用PCR检测磁珠上H. pylori特异性16S rDNA、ureA基因的阳性情况。结果 通过PCR检测,4株临床来源的念珠菌的ureA基因为阳性,Ca10231的ureA基因为阴性。接种临床来源的4株念珠菌与H. pylori菌株的尿素培养基颜色由黄色变为红色,而接种Ca10231的培养基未变色,表明这4株临床来源的念珠菌菌株具有尿素酶活性,而Ca10231不具有尿素酶活性。通过SEM可观察到,与4株临床来源的念珠菌及H. pylori共同孵育后的磁珠表面都附着有H. pylori,其中与1株阴道念珠菌和1株胃念珠菌及H. pylori共同孵育的磁珠,经PCR检测,H. pylori 16S rDNA、ureA基因均为阳性;与另2株念珠菌共同孵育的磁珠,PCR为阴性。结论 部分H. pylori特异性基因阳性的念珠菌可以释放出H. pylori。