基金项目: 上海市自然科学基金项目(编号:23ZR1477500);
作者:张魁枝;卢光照;鲁莹;余史丹;张黎
关键词:雷帕霉素;光敏;纳米盘;高效液相色谱法;卵巢癌;抗肿瘤;
DOI:专辑:工程科技Ⅰ辑;医药卫生科技
〔摘 要〕 目的 制备负载雷帕霉素的光敏纳米盘,并评价其体外抗卵巢癌活性。方法 采用薄膜水化法制备纳米盘,通过动态光散射和透射电子显微镜表征其粒径、电位和形貌;建立高效液相色谱法测定雷帕霉素含量,并验证方法专属性、线性、精密度、重复性、稳定性与加样回收率。通过单线态氧检测探针与反向透析法,分别评估了纳米盘在近红外光下的单线态氧生成与光控释药性能。通过检测细胞代谢活性,评估纳米盘对人卵巢癌细胞OVCAR-8的杀伤作用。采用共聚焦显微镜观察与流式细胞术,分别对纳米盘的细胞摄取行为及其内吞机制进行探究。结果 纳米盘粒径为(63.66±0.27)nm,电位为(-18.2±2.4)mV,稳定性良好。透射电镜结果显示其具有类球状或短棒状形态。雷帕霉素在0.2~40 μg/mL的浓度范围内峰面积线性良好(R2 = 0.999 9),精密度、重复性和回收率的相对标准偏差(RSD)均小于5%。在近红外光照射下,纳米盘可有效产生单线态氧;同时,单线态氧可诱导脂质膜氧化,进而显著促进雷帕霉素的响应性释放(P<0.001)。纳米盘本身无显著细胞毒性,而经近红外光照射后对卵巢癌细胞的毒性显著增强。细胞摄取实验证实,纳米盘主要通过网格蛋白介导的能量依赖型内吞途径进入细胞(P<0.001),光照后可触发药物释放。结论 成功制备雷帕霉素光敏纳米盘,其在体外表现出显著的光控释药特性及增强的抗卵巢癌活性。